duole多乐游戏:氨基活化琼脂糖磁珠氨基琼脂糖微球Magarose-NH2

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  ）是一种6%交联的磁性琼脂糖微球，磁珠在长距离臂的结尾含有反响性伯胺，含有羧基（-COOH）的分子共价偶联，用于亲和纯化。凝胶关于固定肽而言是抱负的，用于抗体或其他结合爱人体的亲和纯化。

  虽然其他胺反响性办法可将分子固定化在氨基活化琼脂糖磁珠上，但碳二亚胺（EDC）在交联剂中是共同的，使得能够经过-COOH偶联。在近中性至酸性pH缓冲液中，EDC能有效地与羧酸盐反响构成中间体酯，其与亲核试剂如氨基活化琼脂糖磁珠上的伯胺反响。在大多数亲和纯化办法中，分子和琼脂糖凝胶载体之间发生的酰胺键是安稳的，而且可防渗漏。

  • 传统上，MES缓冲液用于EDC反响，由于它不含有竞争性的胺或磷酸盐，而且有效地坚持了最佳的偶联酸条件。但是，若需求，能够替换其他缓冲液，而且偶联将有效地进行至pH 7.2。虽然磷酸盐缓冲液能够与EDC反响，但下降偶联功率。乙酸盐、Tris和甘氨酸缓冲液与EDC或O-酰基异脲中间体反响，不是适宜的偶联缓冲液。别的，避开运用含有硫醇的缓冲液，这些硫醇不可逆地结合EDC并使之失活。碘化物、氯化物和溴化物等卤化物对pH值为5和7之间的EDC基本上没有影响。

  2浆液，以取得均匀的磁珠悬浮液。运用移液枪将适量的磁珠转移到微量离心管中。

  磁别离后的磁珠，用磷酸盐缓冲盐水（PBS）或含有0.05％叠氮化钠的其它适宜缓冲液平衡，4℃下保存。